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尤长宣 主任医师 南方医科大学南方医院 肿瘤科门诊
免疫组化是一种利用抗体与组织或细胞样本中的特定抗原结合的方法，以检测和定位这些抗原的存在和位置的实验技术。以下是免疫组化的基本流程：
1.样本制备：需要从组织或细胞样本中提取蛋白质，然后将其固定在载玻片上。
2.抗原修复：由于某些固定方法可能会导致抗原的部分或全部失活，因此需要进行抗原修复处理，以使抗原重新暴露出来。
3.阻断内源性过氧化物酶：为了避免非特异性染色，需要阻断内源性过氧化物酶的活性。
4.孵育一抗：将样本与一抗孵育，一抗是一种能够与目标抗原特异性结合的抗体。
5.孵育二抗：二抗是一种能够与一抗结合的抗体，通常标记有酶或荧光染料。
6.显色反应：如果使用酶标记的二抗，需要加入显色底物，以使酶与底物反应产生颜色。如果使用荧光标记的二抗，则可以直接观察荧光信号。
7.复染和封片：为了使细胞核染色，需要对样本进行复染，然后用封片剂封片，以防止样本干燥和褪色。
8.显微镜观察：最后，可以在显微镜下观察样本，以确定目标抗原的存在和位置。
总之，免疫组化是一种非常重要的实验技术，可以用于研究细胞和组织中的蛋白质表达和分布，对于疾病的诊断、治疗和研究具有重要的意义。
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