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于清宏 主任医师 教授 南方医科大学珠江医院 风湿免疫科
免疫吸附是一种利用特异性抗体与抗原相互作用的技术用于分离和纯化目标物质的方法。该方法在生物医学研究和临床诊断中得到了广泛应用。下面将详细介绍操作步骤。
1.准备材料:选择合适的固定材料,如管壁、微孔板等,将具有特异性的抗体固定在材料上,保持抗体的活性并降低非特异性吸附。
2.样品预处理:根据不同的样品特性,选择合适的处理方法,如离心、滤液、稀释等,以获得适宜的样品浓度和纯度。
3.样品与探针结合:将样品与标记有特异性抗体的探针混合,使其发生特异性结合。探针可以选择荧光染料、酶物质等,用于标记和检测。
4.免疫复合物分离:将上述免疫复合物加入固定有抗体的材料中,通过抗原与抗体的特异性结合而吸附在材料表面。非特异性物质会被洗掉,使目标物质得以分离和纯化。
5.目标物质的洗脱:经过免疫吸附后,目标物质通常会与抗体结合得较为牢固,因此需要使用适当的洗脱方法来使其与抗体解离。常见的洗脱方法包括调整酸碱度、加入特定离子、竞争性抗体等。
6.目标物质的检测和分析:经过洗脱后的目标物质可以进行进一步的检测和分析,如荧光、酶标、质谱等。
通常需要患者前往医院,由专业医生进行规范操作,同时还要根据检查结果,结合实际情况配合医生做相关治疗,并定期前往医院做复查。
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